Análise citogenética de Coffea canephora

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2001

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Com o objetivo de obter cromossomos de C. canephora (2n=2x=22) morfologicamente adequados para serem caracterizados citogeneticamente e identificados para montagem do cariograma desta espécie, empregaram-se novas técnicas citogenéticas associadas às metodologias computacionais de análise de imagens. Sementes foram germinadas em placas de Petri a 28oC, em estufa. Raízes com aproximadamente 0,5 cm foram pré-tratadas com brometo de etídeo a 10 µM com 100 µl de DMSO, por 24h a 5oC. Fixaram-se as pontas de raízes excisadas em solução de metanol: ácido acético (3:1), armazenando-as -20oC. Após 24 horas, as pontas de raízes foram digeridas enzimaticamente com solução de Flaxzyme diluída em água destilada (1:60) por 10 minutos à temperatura ambiente. Prepararam-se as lâminas por dissociação celular do meristema, simultâneamente com gotejamento da solução fixadora, sendo elas, em seguida, secadas ao ar. A coloração foi obtida com solução de Giemsa a 2% em tampão fosfato pH 6,8. As metodologias empregadas permitiram a obtenção de cromossomos com alta qualidade citogenética e resolução adequada para caracterização de cada par de homólogos, aparentemente semelhantes, quando obtidos por meio de técnicas convencionais. A caracterização da morfologia desses cromossomos resultou em dados que diferiram daqueles relatados na literatura.
With the objective of obtaining chromosomes morphologically adequate to make a caryogram of this species, it was used a new cytogenetics technique associated to a computer methodology of the image analysis. Seeds were germinated in Petri dishes in the dark at 28 °C. Root 0.5 cm in length were pre-treated at 10 µM ethidium bromide solution plus 100 µl DMSO, for 24 h at 5oC. Root tips were fixed in fresh cold methanol-acetic acid (3:1) and were stored at -20 °C. One day later the root tips were macerated using a Flaxzym enzymatic solution diluted in distilled water (1:60), for 10 min at room temperature. The chromosome slides were prepared by meristem celular dissociations with dropping fixing solution at the same time, air drying and stained with Giemsa 2% in phosphate buffer, pH 6.8, for 5 min. The methodologies used show a good definition to help chromosome identification, apparently similars when obtained by conventional techniques. The chromosomes characterisation as showing in this study do not agree with those related by other authors.

Descrição

Trabalho apresentado no Simpósio de Pesquisa dos Cafés do Brasil (2. : 2001 : Vitória, ES). Resumos. Brasília, D.F. : Embrapa Café, 2001. 181p. : il.

Palavras-chave

Café Coffea canephora Citogenética Cariograma Análise de imagem, Coffee Coffea canephora Cytogenetics Caryogram Image analysis

Citação

Dantas, Bárbara Pereira; Carvalho, Carlos Roberto. Análise citogenética de Coffea canephora. In: Simpósio Brasileiro de Pesquisa dos Cafés do Brasil (2. : 2001 : Vitória, ES). Anais. Brasília, D.F. : Embrapa Café, 2001. (CD-ROM), p. 261-267.

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