Estudos citogenéticos em Coffea L. e Psilanthus Hook. F. com o uso de CMA/DAPI e Fish

Abstract

Os gêneros Coffea e Psilanthus são taxonomicamente muito próximos e sua citogenética apresenta poucos estudos devido ao reduzido tamanho dos cromossomos de suas espécies e à simetria cromossômica que estes apresentam. Com o surgimento das técnicas de citogenética molecular, que permitem a identificação de bandas de heterocromatina bem como seqüências específicas de DNA nos cromossomos, novas perspectivas se abriram para a caracterização citogenética destas espécies. Neste trabalho estudamos quatro espécies do Banco de Germoplasma de Café do IAC: Coffea brevipes, C. racemosa, Psilanthus bengalensis e P. travancorensis. Para as quatro espécies a literatura apresenta somente dados de número cromossômico, sendo este 2n=22, número estável e conservado para as espécies diplóides de café. Para os ensaios de bandamento heterocromáticos utilizamos os fluorocromos CMA 3 e DAPI. Para os procedimentos de FISH (Fluorescence in situ hybridization) utilizamos as sondas pTa71 e pScT7, específicas para a localização dos sítios de DNA ribossômico 18S-5.8S-26S (NOR) e 5S respectivamente. Como esperado, as quatro espécies apresentaram cromossomos relativamente pequenos (1-3mm) e simétricos. Nenhuma das espécies apresentou bandas DAPI positivas. C. racemosa e P. travancorensis apresentaram dois pares de bandas CMA 3 positivas enquanto as outras duas espécies apresentaram somente um par. Apenas C. racemosa apresentou mais de um par de sítios NOR. Todas as espécies apresentaram apenas um par de sítios de DNA ribossômico 5S. Embora tenhamos observado uma marcante similaridade cromossômica entre as espécies e gêneros estudados, as análises comparativas baseadas nestes marcadores citogenéticos contribuíram para a caracterização cariotípica destas espécies, além de trazer mais dados para posteriores discussões taxonômicas dentro do grupo.