ANÁLISES DA EXPRESSÃO GÊNICA POR PCR QUANTITATIVO EM TEMPO REAL (QPCR) DE GENES CANDIDATOS PARA A TOLERÂNCIA À SECA EM CAFEEIRO

Abstract

A seca é uma das principais limitações climáticas à produção do cafeeiro. A importância dessa limitação deve aumentar, em função das mudanças reconhecidas no clima global e, também, porque a cafeicultura vem sendo expandida para regiões marginais onde a baixa pluviosidade e temperaturas desfavoráveis se constituem grandes limitações à produção do café. A seca induz diversas respostas fisiológicas e moleculares nas plantas, incluindo alterações da expressão gênica, visando atingir ajuste osmótico, a indução de reparadores de sistemas moleculares e a expressão de diversas proteínas protetoras. Existem diversas formas de se avaliar a expressão gênica em plantas submetidas ao estresse hídrico. Uma técnica amplamente utilizada nos últimos anos, para a análise quantitativa da expressão gênica é a de PCR quantitativo em tempo real (qPCR). O objetivo do presente trabalho foi analisar a expressão de 14 genes candidatos para a tolerância à seca em cafeeiro, pré-selecionados em estudos de macroarranjos de cDNA, utilizando clones de Coffea canephora (Clone 22 – sensível e clones 14, 73 e 120 – tolerantes ao estresse hídrico).Drought is one of the main weather constraints of coffee production. Its importance should increase, according to the recognized changes in global climate, and also because coffee is being expanded to marginal regions where low rainfall and unfavorable temperatures are major limitations to coffee production. Drought induce various physiological and molecular responses in plants including changes of gene expression, in order to achieve osmotic adjustment, the induction of repair systems and molecular expression of various protective proteins. There are several ways to evaluate the gene expression in plants subjected to water stress. A widely used technique in recent years for the quantitative analysis of gene expression is the real-time quantitative PCR (qPCR). The objective of this study was to analyze the expression of 14 candidate genes for drought tolerance in coffee, pre-selected in macroarrays studies, using Coffea canephora clones (Clone 22 – susceptible and clones 14, 73 and 120 – tolerant to water stress).