Calogênese em anteras de cafeeiro Coffea arabica L.

Abstract

Objetivou-se com este trabalho, estudar a calogênese em anteras oriundas de uma população segregante F2 de Coffea arabica L. Na indução de calogênese, foi efetuada a assepsia dos botões florais com álcool 70% por 1’, hipoclorito de sódio 1,4% durante 15’. Em seguida, as anteras foram extraídas, inoculadas em meio "IC" (indução de calos) e mantidos em estufa tipo BOD, sob temperatura de 27 ±1°C. Para controlar a contaminação causada por fungos e bactérias, foram acrescidos ao meio 10 mg L-1 de benomyl e 50 mg L-1 de cloranfenicol após o meio ter sido autoclavado. Os meios de cultura tiveram o pH ajustado para 5,7 ±1 antes de serem autoclavados. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente causalizado, com 4 repetições e 30 anteras por placa. Experimento 1: meio IC suplementado de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mgL-1) e cetina (0, 2, 4 e 8 mgL-1). Experimento 2: meio IC suplementado de cinetina (0, 2, 4 e 8 mgL-1), ácido indol butírico (0; 0,5; 1 e 2 mgL-1) e 2 mgL-1 de 2,4-D. Experimento 3: meio IC suplementado de cinetina (0, 1, 2, 4 e 8 mgL-1), ácido giberélico (0; 2,5; 5; 10 e 20 mgL-1) e 8 mgL-1 de ácido naftalenoacético. Concluiu-se que a presença de fungicida e bactericida adicionados ao meio de cultura reduz consideravelmente a contaminação causada por microorganismos. A combinação entre 2,4-D e cinetina favorece a indução de calos primários. A combinação de concentrações de 8 mgL-1 cetina e AIB a 1 mgL-1 atua favoravelmente na indução de calos. Sugere-se que o GA3 tenha um efeito no aumento da rapidez de crescimento dos calos provenientes de anteras de cafeeiro.This work was carried out, to sudy the anthers callogenesis from Coffea arabica L. segregated population F2 in the callogenesis induction, the floral buds had an asepsis with 70% alcohol during 1’, with sodium hipochoride 1,4$ during 15’.Later, the anthers were extracted, inoculated in "IC" medium - Callus Induction and kept in the growth chamber from the type BOD under 27º±1ºC temperature. To control fungi and bacteria contamination it was added to the medium 10 mgL-1 of Benomyl and 50 mgL-1 of chlorophecical right after autoclaveted the medium. The culture media had their pH adjuntesd to 5,7 ±1 before they had been autoclaved. There were three experiments. The experimental design used here was randomized factorial scheme4x 4, expept for the experimtal number3, that was factorial sheme 5 x 5. All experiments had 4 competitions and 30 anthers per disk. The experiment number 1: coffe anthers were inoculated in IC medium supplied with 2,4-D (0, 1, 2 and 4 mgL-1) and kinetine (0,2,4 and 8 mgL-1). The experiment number 2: coffee anthers were inoculated in IC medium supplied with kinetine (0,2,4 and 8 mgL-1), indol butric acid (0; 0,5; 1 and 2 mgL-1) and 2 mgL-1 of 2,4-D. The experiment number 3: those coffee anthers were inoculated in IC medium supplied with kinetine (0, 1, 2, 4 and 8 mgL-1), giberellic acid (0; 2,5; 10 and 20 mgL-1) and 8 mgL-1 of haphthalenoacetic acid. It was concluded that fungicide and bactericide added into the medium decrease greatly contamination causec by microorganisms, 2,4-D and kinetine combination are very much favorable to the primary callus induction. The dosage combinations of kinetine to 8 mgL-1 and AIB and also to 1 mgL-1 acts in the callus induction, although there are few account in the literature about those combinations action of GA3 with other regulator to callus induction in anthers, it suggests that those have an effect in the quickly increase in the callus formation.