Callus induction and embryo regeneration in Coffea arabica L. anthers by silver nitrate and ethylene

Abstract

The genetic breeding of coffee by conventional methods to obtain new cultivars is time-consuming. Anther culture can yield homozygous lines quickly from bi-haploids. This study used anther cultures of Coffea arabica L. cv. Catuaí Vermelho 99, and tested the effect of silver nitrate (AgNO 3 ) and ethylene in callus-formation induction and bi- haploid seedling regeneration. The anthers were inoculated in MS to which 2 mg L-1 2,4-D had been added with AgNO 3 (5 mg L-1 ) together with ethylene being introduced or not, for different periods (the control, 2, 4, 6, and 8 days). At the end of 12 days, the anthers were transferred to the regeneration medium, to which 0.108 mg L-1 kinetin had been added. Greater oxidation and intumescence were observed in the first days after exposure to ethylene; the cultivar Catuaí Vermelho 99 responded to callus formation and also direct embryogenesis in the presence of ethylene.O melhoramento genético do cafeeiro por métodos convencionais é um processo demorado para aquisição de uma nova cultivar. Através da cultura de anteras podem-se obter linhagens homozigóticas rapidamente, oriundas de dihaplóides. O objetivo foi utilizar na cultura de anteras na cv. Catuaí Vermelho 99 de Coffea arabica L., nitrato de prata (AgNO 3 ) e etileno para induzir a formação de calos e regenerar plântulas dihaplóides. As anteras foram inoculadas em meio MS acrescido de 2 mg L-1 de 2,4-D com e sem AgNO 3 (5 mg L-1 ), juntamente com etileno por diferentes dias: (testemunha; 2; 4; 6, e 8). Ao final de 12 dias, estas foram transferidas para o meio de regeneração, acrescido de 0,108 mg L-1 de cinetina. Foi observada uma oxidação e intumescimento maior nos primeiros dias de inoculação em exposição ao etileno, e a cv. Catuaí Vermelho 99 respondeu a formação de calos e também a embriogênese direta na presença do etileno.