Teses e Dissertações
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Item Embriogênese somática em cafés arábica e robusta(Universidade Federal de Viçosa, 2003) Barbosa, Wellington Marota; Sakiyama, Ney Sussumu; Universidade Federal de ViçosaA indução calogênica em explantes foliares de C. canephora cv. Apoatã foi induzida utilizando-se cultivo unifásico com BAP como regulador de crescimento. Para o genótipo Catimor utilizou-se o sistema bifásico com citocinina e auxina. Foram confeccionadas lâminas de amostras dos explantes foliares que, após coletados e fixados foram incluídos em metacrilato, cortados em micrótomo rotativo, corados com Azul de Toluidina e submetidos aos testes histoquímicos para detecção de amido (P.A.S. - “Periodic Acid Schiff”) e de proteína (XP - “Xylidine Ponceau”). Calos embriogênicos e calos embriogênicos friáveis foram formados apenas no genótipo Apoatã. No genótipo Catimor, cultivado apenas com citocinina, houve a formação de calos embriogênicos, enquanto que naquele cultivado com auxina e citocinina houve a formação de calos mistos. Nos genótipos Catimor UFV 395-141 e Apoatã, cultivados apenas com citocininas, observou-se um dimorfismo nas células que formam o calo - o primeiro com células maiores, vacuolizadas e sem reservas (amido e proteína), e outro formando grupos de células com características meristemáticas, menores, isodiamétricas, com pequenos grânulos de amido, núcleo proeminente e citoplasma denso, com grande quantidade de proteína – denominadas células embriogênicas. Tais células são responsáveis pela formação dos pré-embriões. No genótipo arábica, cultivado em meio com 2,4-D e KIN, observou-se que as divisões celulares foram unidirecionais. As células com características meristemáticas, estavam localizadas apenas nas extremidades do calo, e se apresentaram com tamanhos semelhantes às demais células que formam o calo e não formaram estruturas organizadas em grupos de células, advindas de divisões periclinais e anticlinais. Estas diferenças na resposta dos explantes a diferentes condições indutoras poderiam ser utilizadas como marcadores estruturais para seleção de cepas potencialmente embriogênicas. Foram também testados diferentes meios de cultura para a indução da reação calogênica em explantes foliares dos genótipos Catimor UFV 395-141, H 337-610 e H 447-12, híbridos segregantes oriundos do programa de melhoramento genético da UFV-EPAMIG. Explantes foliares dos híbridos Catimor UFV 395-141 e H 337-610 produziram calos embriogênicos (CE) com o suprimento de 2,4-D e BAP, nos meios primários e secundários, respectivamente; no entanto, com baixa freqüência. O híbrido H 447-12 apresentou CE quando os meios continham 2,4-D e BAP no meio primário, e em maiores freqüências, em relação aos outros genótipos testados. Calos friáveis embriogênicos foram obtidos nos três genótipos utilizando-se citocinina (BAP) no meio primário, acrescentado de auxina (2,4-D) no meio secundário. Culturas líquidas foram estabelecidas e, depois de realizada a indução embriogênica dos agregados celulares, obtiveram-se rendimentos de 148.000 embriões.g-1 para o genótipo Catimor UFV 395-141, 160.000 embriões.g -1 para o híbrido 337-610 e 90.000 embriões.g -1 para o híbrido 447-12. Amostras de embriões somáticos tipo torpedo dos três genótipos foram tomadas para avaliação do desenvolvimento embriogênico, e apresentaram valores, respectivamente de desenvolvimento e formação de raízes, de 89 e 42%, no genótipo Catimor UFV 395-141. Para o híbrido H 337-610, esses valores foram de 83 e 53% e, 66 e 39,3% para o híbrido H 447-12.