Teses e Dissertações

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    Análise da expressão dos genes Baby Boom (BBM) e Somatic Embryogenesis Receptor-like Kinase (SERK) envolvidos na embriogênese somática do cafeeiro (Coffea arabica L.)
    (Universidade Federal de Lavras, 2011-02-25) Silva, Anderson Tadeu; Paiva, Luciano Vilela
    Retrata-se, neste estudo, os genes identificados e caracterizados na embriogênese somática de Coffea arabica L. cv Catiguá conduzidos no Laboratório Central de Biologia Molecular (LCBM), na Universidade Federal de Lavras (UFLA), Minas Gerais. A embriogênese somática – formação do embrião a partir de células somáticas é um mecanismo de reprodução assexuada natural em algumas espécies vegetais, mas que pode ser induzido in vitro de modo generalizado. Análises histológicas das características diferenciadoras entre células somáticas e embriogênicas podem ser usadas para aumentar a eficiência metodológica, porém, não permitem o diagnóstico dos eventos indutores da transição entre essas características e, portanto, o estudo e obtenção de marcadores moleculares ligados aos eventos de transição são de extrema utilidade. Nesse contexto, foi avaliada a expressão in silico e in vitro dos genes SERK (Somatic Embryogensesis Receptor Kinase) e BBM (Baby Boom), envolvidos no processo de transição do estado vegetativo para o embriogênico, visando à expressão diferencial “in vitro” e também a busca por um marcador molecular, mediante análises in silico. No artigo 1 apresenta-se a expressão diferencial do gene SERK nos estágios de calos embriogênicos, calos não embriogênicos e suspensão celular. Um total de três ESTs-contigs foram analisados, em que o ESTs-contig 166 apresentou, em sua expressão, características diferenciadas para a embriogênese de café. Esses dados sugerem que o ESTs-contig 166 seja o possível ortólogo de SERK em C. arabica (CaSERK) e indicam que essa estratégia pode aumentar ainda mais a eficiência metodológica para a obtenção de suspensão de células embriogênicas - ECS, em outras espécies e cultivares . No artigo 2 apresenta-se a expressão diferencial do gene BBM nos estágios de calos embriogênicos, calos não embriogênicos e suspensão celular. Um total de dois ESTs-contigs foram analisados, em que o ESTs-contigs 9 apresentou uma alta e exclusiva expressão nos estágios de calos embriogênicos e suspensão celular, em relação aos calos não embriogênicos. Esses dados sugerem que ESTs-contig 9 seja o possível ortólogo de BBM em C. arabica (CaBBM) e indicam que o uso dele como marcador molecular pode aumentar ainda mais a eficiência metodológica durante a obtenção de materiais embriogênicos de cafeeiro. Pelo artigo 3 indica-se uma relação transiente de indução e retroinibição entre CaBBM e CaSERK durante a curva de crescimento das ECS, na qual a expressão diametralmente opostas entre eles coincide com a estabilização da taxa de crescimento das ECS. No artigo 4 apresenta-se a possíbilidade de cinco ESTs-contigs identificados in silico nas bibliotecas de cafeeiro, também serem usados como marcadores do processo de aquisição embriogênica.
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    Análise da resistência ao bicho-mineiro e caracterização de genótipos de Coffea arabica com microssatélites
    (Universidade Federal de Lavras, 2011-02-18) Pereira, Gabriella Santos; Pinho, Édila Vilela de Resende Von
    Em programas de melhoramento de instituições de pesquisas do café no Brasil buscam-se genótipos de Coffea arabica resistentes ao bicho-mineiro, praga que causa maiores danos nas lavouras cafeeiras. Os marcadores moleculares de microssatélites ou SSR podem ser uma alternativa nos programas melhoramento genético do cafeeiro, acelerando a obtenção de novos genótipos com resistência à esta praga. Estes marcadores podem ser utilizados ainda para a caracterização de cultivares em bancos de germoplasma. Objetivou-se nesta pesquisa, analisar genótipos de C. arabica que segregam para a característica de resistência ao bicho-mineiro e caracterizar genótipos de café arábica, utilizando-se marcadores moleculares do tipo EST-SSR e SSR. Para a análise da resistência ao bicho-mineiro foram usados 66 locos SSR (simple sequence repeat), dos quais 63 foram desenvolvidos a partir de EST (expression sequence tag) do Genoma Café. Estes primers foram testados em bulks de indivíduos de 10 famílias resistentes e 10 famílias suscetíveis e em oito acessos de Coffea racemosa, espécie doadora da característica de resistência ao bicho-mineiro. Foi verificado polimorfismo entre os genótipos resistentes e os suscetíveis, quando da utilização de dois primers. Em seguida, foram analisados 78 indivíduos das 10 famílias susceptíveis e 55 das 10 famílias resistentes em F 5 e 37 indivíduos resistentes e 54 susceptíveis em F 6 . Os dois alelos polimórficos identificados por meio dos dois primers estiveram presentes em torno de 70% dos genótipos susceptíveis em F 5 e em aproximadamente 90% dos indivíduos susceptíveis em F 6 . Não foi encontrado nenhum alelo ligado à característica de resistência em estudo. Assim, foi possível diferenciar genótipos de café arábica resistentes ao bicho-mineiro em relação aos suscetíveis por meio de marcadores microssatélites. Para a caracterização dos genótipos, foram utilizados 38 primers, sendo 34 do tipo EST-SSR, em 12 cultivares e 3 clones de C. arabica. Foram observados sete locos polimórficos entre os genótipos. Pelo dendrograma obtido a partir dos coeficientes de Jaccard, foi observado um menor valor de similaridade genética, 0,88, entre a cultivar Acauã e os demais genótipos e similaridade de 100% para sete cultivares e um clone. Foi possível caracterizar as cultivares Acauã, IBC- Palma 2, Sabiá Tardio e Icatu Amarelo IAC 3282 por meio de sete primers.