UFLA - Dissertações
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Item Otimização de técnicas de cultura de tecidos para o cafeeiro (Coffea arabica L.)(Universidade Federal de Lavras, 1998-02-18) Andrade, Luciana Marques da Cunha Oliveira; Pasqual, MoacirOs objetivos deste trabalho foram os de se testar metodologias de cultura de tecidos como a cultura de anteras, a micropropagação e a cultura de embriões para as cultivares de café pertencentes a coleção “in vivo” da Universidade Federal de Lavras. Para isso, foi necessário determinar: o tamanho do botão floral ideal para obtenção de plantas haplóides através da cultura de anteras, determinar, na micropropagação: as melhores concentrações utilizadas dos reguladores de crescimento BAP (6-benzilaminopurina), GA; (ácido giberélico). e TDZ (N-phenil-N-1,2,3-thiadiazol-S-iluréia), e na cultura de embriões, determinar quais as melhores concentrações dos reguladores de crescimento ANA (ácido naftalenoacético) e BAP. Foram realizadas análises morfológicas e citológicas em botões florais de 4 cultivares de Coffea arabica: cv. Mundo Novo, Catuai, Icatá e Rubi, observou-se que para todos os genótipos, o micrósporo não vacuolado com núcleo central, ideal para a obtenção de haplóides através da cultura de anteras, ocorre com mais frequência em botões florais variando de 4,5 a 6,0 mm de comprimento, contendo anteras que variam de 4,5 a 5,5 mm de comprimento. Para os experimentos de micropropagação, foram utilizadas como explantes, microestacas da cultivar Catuai, onde foram testadas diversas combinações entre os reguladores de crescimento BAP e GA; e de TDZ e GA; resultando em um fatorial 4x5, dispostos em um delineamento inteiramente casualisado. Para se verificar o efeito das diferentes combinações dos reguladores de crescimento, foram feitas avaliações periódicas com relação ao numero de brotações, brotos maiores que um centimetro, número total de folhas, peso da matéria fresca e seca das brotações. Os melhores resultados para a combinação BAP e GA; foram obtidos na ausência de GA; e presença de BAP. Para a combinação TDZ e GA;, os melhores resultados foram obtidos quando a concentração máxima testada de GA, foi associado às concentrações mínimas de TDZ. Na cultura de embriões, foram utilizados embriões da cv. Catuai, com os * Orientador: Prof. Moacir Pasqual. Membros da banca: Profº. Lisete Chamma Davide, Prof. Eduardo Bearzoti e Prof”. Patrícia Duarte Oliveira Paiva quais foram testadas combinações entre concentrações dos reguladores de crescimento ANA e BAP, resultando em um fatorial 4x4, dispostos em um delineamento inteiramente casualisado. Para todas as características avaliadas, os melhores resultados foram observados na concentração de BAP igual a 7,40 mg/l, associado a concentração de ANA igual a 1,0 mg/1.. Modelos de superfície de resposta foram utilizados nos experimentos de micropropagação e cultura de embriões, para otimizar as concentrações dos reguladores de crescimento utilizados. Este trabalho faz parte do programa de melhoramento do cafeeiro da Universidade Federal de Lavras.Item Caracterização funcional de genes da família multdrug and toxic compound extrusion (MATE) envolvidos na adaptação de Coffea arabica à solos ácidos(Universidade Federal de Lavras, 2016-09-06) Pinto, Renan Terassi; Paiva, Luciano VilelaA partir da expansão da fronteira agrícola, o cultivo de espécies do gênero Coffea expandiu-se para áreas marginalizadas em termos de fertilidade de solos, como o Cerrado brasileiro. Os primeiros trabalhos relacionados ao levantamento das características deste ambiente evidenciaram, dentre outros aspectos, os problemas relacionados à toxidez do alumínio e a baixa disponibilidade de fosfatos. Apesar das técnicas aplicadas para a correção destes problemas serem amplamente difundidas, estas não são facilmente aplicadas em cultivos perenes e, além disso, baseiam-se na alteração do ambiente para o cultivo do vegetal, o que pode culminar em impacto ambiental. Dessa forma, o estudo dos mecanismos moleculares relacionados à adaptação pode impulsionar o desenvolvimento de programas de melhoramento genético, convencional e baseado em biotecnologia, que culminem na manutenção da produtividade do setor cafeeiro de forma sustentável. Neste contexto, a partir deste trabalho, objetivou-se elucidar os membros da família gênica Multi drug and toxic compound extrusion (MATE) em Coffea canephora afim de identificar, dentre os diversos membros desta família multifuncional, genes relacionados à tolerância ao alumínio e analisar a influência destes genes sobre os mecanismos de tolerância à este estresse em Coffea arabica. O estudo in silico da família MATE possibilitou a identificação de 60 proteínas presentes em C. canephora. Destacaram-se as proteínas CcMATE7 e CcMATE43 provavelmente relacionadas ao transporte de alcalóides em C. canephora, também alguns potenciais transportadores de flavonóides, CcMATE18 e CcMATE20 e a proteína CcMATE42, potencialmente associada ao efluxo do ânion citrato, que pode minimizar os efeitos tóxicos do alumínio solúvel e auxiliar a absorção de fosfatos. A partir deste candidato em potencial, foram identificados dois genes homeólogos em C. arabica, um relacionado ao subgenoma derivado do ancestral C. canephora (CaMATE_C) e outro do ancestral C. eugenióides (CaMATE_E). A partir de um experimento em hidroponia, foi demonstrado por RT-qPCR que estes homeólogos apresentam perfis distintos de expressão gênica sob estresse causado por exposição ao alumínio. O gene CaMATE_E foi considerado mais responsivo à este estímulo e com perfil de expressão condizente com a exsudação de citrato, mesmo não havendo elementos cis-regulatórios especificamente relacionados à tolerância à alumínio que expliquem esta diferença. Em conclusão, este trabalho pode fornecer informações relevantes para os estudos relacionados aos mecanismos de adaptação de espécies do gênero Coffea à solos ácidos, sendo estes pertinentes para o cultivo produtivo e sustentável do cafeeiro neste ambiente.Item Estudo da compatibilidade entre clones de Coffea canephora por meio de marcadores SNPs(Universidade Federal de Lavras, 2018-03-01) Mattos, Nathália Gomes; Andrade, Alan CarvalhoCoffea canephora é uma planta perene, pertencente à família Rubiaceae, diploide (2n = 2 × = 22), alógama, que apresenta alta variabilidade genética, e por consequência, sua lavoura é formada a partir de clones. No cenário mundial, o café é uma das commodities agrícolas mais importantes e o Brasil é o maior produtor, com cerca de 30% da produção mundial. C. canephora corresponde a 37% da produção mundial e 24% da brasileira. A espécie C. canephora apresenta autoincompatibilidade do tipo gametofítica, onde o grão de pólen não deve compartilhar o mesmo alelo da planta receptora. O presente trabalho estudou a compatibilidade existente entre 13 clones de C. canephora, denominados CCEs, por meio de marcadores SNPs. A metodologia utilizada foi eficiente em reconstruir o pedigree de progênies de 10 clones CCE, identificando corretamente o parental materno na quase totalidade das plantas analisadas. Os resultados obtidos, também sugerem uma similaridade genotípica de 99,8 % entre os clones CCE04 e CCE11, sugerindo que essas plantas podem ser idênticas. As análises de parentais realizadas com o programa Cervus, mostrou-se eficiente em inferir sobre a compatibilidade entre os clones testados, no qual o clone CCE07 se mostrou compatível com todos os outros CCEs testados, o que poderia indicar um alto potencial produtivo deste clone, o que foi confirmado com dados experimentais.Item Análise de expressão gênica de membros da família Saur durante a embriogênese somática de Coffea arabica(Universidade Federal de Lavras, 2017-04-17) Zanin, Fabiana Couto; Diniz, Leandro Eugenio CardamoneTendo em vista a importância do processo de embriogênese somática para a obtenção em larga escala de embriões produtivos selecionados e para pesquisas de melhoramento genético, o presente trabalho objetivou-se por caracterizar os genes SAUR em Coffea canephora e analisar a expressão gênica de alguns membros da família durante a embriogênese somática, além de especular suas possíveis funções. A análise in silico da família gênica foi realizada a partir da comparação de proteínas SAUR já caracterizadas em outras espécies com sequências de café distribuídas no banco de dados Coffee Genome Hub, que passaram por análise de redundância e presença do domínio conservado característico dos genes. Foi construída uma biblioteca de transcritos de C. arabica a partir de amostras de cDNA de calos não embriogênicos (CNE), calos embriogênicos (CE) e suspensões celulares (ECS) sequenciadas, onde foram identificados genes SAUR diferencialmente expressos. O perfil de expressão foi então analisado por RT-qPCR em amostras de C. arabica. Em C. canephora foram encontrados 31 membros da família SAUR, destes, 8 encontraram-se diferencialmente expressos nas bibliotecas sequenciadas e o perfil dos genes SAUR5, 12, 13, 18 e 20 foram analisados in vivo no presente trabalho. Ainda são necessários estudos mais aprofundados para determinar as funções de cada um dos genes analisados durante a embriogênese somática, mas os resultados obtidos parecem estar de acordo com outros estudos de que os genes SAUR são induzidos por auxina e estão, em grande parte, envolvidos com expansão e elongação celular.Item Identificação de polimorfismos no Flowering Locus T (FT) e sua expressão gênica em diferentes espécies do gênero coffea.(Universidade Federal de Lavras, 2016-07-29) Cardon, Carlos Henrique; Chalfun Junior, AntonioDevido à grande importância econômica e social do café, principalmente para o Brasil por ser o maior produtor e exportador do mundo, é objetivo de todos entenderem melhor e aprimorar as técnicas de manejo a fim de melhorar a qualidade do produto e reduzir custos na produção. Um dos maiores problemas encontrado pelos produtores na cafeicultura é a florada sequencial e desuniforme do cafeeiro, agregando custos elevados para a produção da bebida com parâmetros de boa qualidade. O aprimoramento dos conhecimentos em genes envolvidos na floração pode ser a chave para o entendimento dessa característica do florescimento do cafeeiro que apesar de vários estudos, até hoje não se tem definido a principal causa desse fenômeno. O gene FLOWERING LOCUS T (FT), é um dos fundamentais durante a indução do florescimento em várias espécies. Polimorfismo na região promotora do gene pode ser determinante para a alteração do comportamento da sua expressão, uma vez que na região promotora existem sequências motivos de ligação de fatores de transcrição fundamentais na regulação da expressão. Com o objetivo de entender melhor a ação do gene FT sobre o florescimento de cafeeiro, ao comparar as regiões promotoras de genótipos representantes das espécies Coffea arabica, Coffea canephora, Coffea eugenioides e Coffea racemosa, encontramos vários motivos dentro das sequências em um comprimento de aproximadamente 1kb. Alguns dos motivos encontrados são de ligação de elementos cis-reguladores ligados ao florescimento que de certa forma atuam sobre o controle da expressão do gene FT em cafeeiro. Apesar de não ter tido relação da expressão do gene FT com as características de florescimento dos genótipos estudados, a identificação de motivos de ligação de fatores de transcrição controlados por estímulos ligados a indução do florescimento em cafeeiro, mostra que o gene FT pode ter uma papel fundamental no entendimento da florada desuniforme do cafeeiro.Item Criopreservação de embriões zigóticos de Coffea arabica por vitrificação(Universidade Federal de Lavras, 2002-03-25) Freitas, Rodrigo Therezan de; Paiva, RenatoDevido à importância econômica e social do cafeeiro para o Brasil, é necessário que sejam adotadas medidas para a conservação do seu recurso genético. Entretanto, em consequência da dificuldade de armazenamento de sementes de café de forma convencional, alternativas biotecnológicas tal como a criopreservação tem sido requerida. Neste contexto, objetivou-se desenvolver um protocolo para a criopreservação de embriões zigóticos de Coffea arabica L. cv. Catuaí Vermelho (IAC 144) pela técnica de vitrificação. Primeiramente, avaliou-se a desinfestação das sementes e a excisão dos embriões zigóticos. Na desinfestação as sementes foram imersas em diferentes concentrações de formaldeído (0; 0,5; 1 e 1,5%) durante diferentes períodos de tempo (5, 15 e 30 min). Para a excisão dos embriões as sementes foram desinfestadas e imersas em solução de ácido bórico 0,5% durante diferentes períodos de tempo (1, 2 e 3 dias). Para o estudo de criopreservação, foram avaliados antes do congelamento diferentes tempos de imersão no Plant vitrification solution 2 (PVS2) (0, 10, 25, 50, 100, e 250 min) em duas temperaturas (0°C e 25ºC). Na sequência foi determinado o melhor tempo de descongelamento em banho-maria (1, 3, 5 ou diretamente em Recovery solution (RS)). Um estudo anatômico foi realizado em embriões zigóticos não criopreservados (controle), e criopreservado com ou sem o uso do crioprotetor PVS2. Posteriormente, foi realizada a aclimatização das plântulas oriundas de embriões criopreservados e não criopreservados. A completa desinfestação das sementes é obtida com 1 ou 1,5% de formaldeído por 30 min. A imersão das sementes por 2 ou 3 dias em solução de ácido bórico 0,5% torna as sementes mais maleáveis para a posterior excisão dos embriões, proporcionando 100% de germinação com plântulas normais. A criopreservação dos embriões zigóticos foi obtida com sucesso por meio da vitrificação. A imersão em solução crioprotetora por 100 min a temperatura de 0ºC permite a criopreservação dos embriões promovendo 80% de germinação com 87% de plântulas normais. Para o descongelamento os embriões zigóticos congelados podem ser descongelados diretamente em RS, eliminando a necessidade de uso do banho-maria. Anatomicamente, observou-se que a solução de PVS2 reduziu o conteúdo interno de água das células verificando-se plasmólises celular, permitindo o congelamento e a posterior retomada de crescimento dos embriões após o descongelamento. Em relação à aclimatização trabalhos adicionais são necessários para melhorar a taxa de sobrevivência das plântulas oriundas de embriões congelados, uma vez que apenas 13% das plântulas sobreviveram após a aclimatização.Item Indução in vitro de calogênese em anteras e brotações em segmentos nodais de Coffea arabica L.(Universidade Federal de Lavras, 2002-03-25) Palú, Ednamar Gabriela; Pasqual, MoacirObjetivou-se estabelecer um protocolo de indução de calos a partir de anteras e estudar a indução de brotações em segmentos nodais, observando a influência da gema apical, do número de gemas e posição de inoculação do explante em Coffea arabica L. Na indução de calogênese em anteras, foi efetuada a assepsia dos botões florais, em seguida as anteras foram extraídas, inoculadas em meio IC e mantidas no escuro por 8 semanas, sob temperatura de 25 ºC. Devido à alta contaminação das anteras inoculas, mesmo com a assepsia realizada nos.botões florais, foi realizado um primeiro experimento testando o pré-tratamento ou não das anteras retiradas em câmara de fluxo laminar, em concentração de 25% de PPM'M (v/v) durante 2 min. e inoculação em diferentes concentrações de PPM'M (0;0,06;0,125;0,250:0,500;0,750 e 1 mL.L-1) adicionadas ao meio de cultura. Para induzir a calogênese em anteras da cv. Acaiá Cerrado foram testadas as concentrações de 2,4-D (0,1,2 e 4 mg.L-1) x cinetina (0,2,4 e 8 mg.L-1) e 2,4-D (0; 0,5; 1 e 2 mg.L-1) x AIB (0; 0,5: 1 e 2 mg.L-1) mais 2 iP (2 mg.L-1) e, para a cv. Rubi, as concentrações de 2,4-D (0,1,2 e 4 mg.L-1) x cinetina (0,2,4 e 8 mg.L-1). Na indução de brotações em segmentos nodais, os explantes foram provenientes de plantas preestabelecidas “in vitro”. Utilizou-se o meio de cultura “MS” suplementado com 3 mg.L-1 de GA; + 6 mg.L-1 de BAP. Os experimentos foram incubados em salas de crescimento com temperatura de 25 + 1 *C e fotoperíodo de 16 horas , sob 35 uM.m-2.s-1 de intensidade luminosa. Foi observada a influência da gema apical, do número de gemas e a posição dos explantes na indução de brotações das cultivares Caturra, Catuaí e Icatu. Conclui-se que o anti-contaminante PPM!'M é eficiente na assepsia das anteras de cafeeiro, através do pré-tratamento destas com solução de 25% (v/v) ou adição de 0,500 mg.L-1 do produto ao meio de cultura. A maior porcentagem de indução de calogênese em anteras na cv. Acaiá Cerrado ocorre com as combinações de 2,4-D (2 mg. L-1) + cinetina (1,9 mg.L-1) e 2,4-D (0,86 mg.L-1) + AIB (1 mg.L-1)+ 2 iP (2 mg.L-1); para cv. Rubi a combinação de 2,4-D (1,9 mg.L-1) e cinetina (4 mg.L-1). Para indução de brotações conclui-se que a utilização de explantes sem a gema apical, com 3 pares de gemas e inoculados na posição vertical, favorecem o maior número de brotações em segmentos nodais de Coffea arabica L.Item Seleção de genes de referência e perfis de expressão gênica da família LAV durante a embriogênese somática em cafeeiro(Universidade Federal de Lavras, 2015-02-26) Freitas, Natália Chagas; Paiva, Luciano VilelaVisando contribuir para a compreensão do processo de indução da embriogênese somática, fundamental para o desenvolvimento de protocolos de regeneração mais eficientes, objetivou-se com esse trabalho identificar, caracterizar e analisar os padrões de expressão dos genes da família LAV durante a embriogênese somática indireta de Coffea arabica L. a partir da normalização de dados de RT- qPCR com genes de referência adequados. A correlação da expressão dos genes com o potencial embriogênico foi realizada comparativamente com o auxílio de análises histológicas e regeneração de embriões somáticos em duas linhagens independentes de suspensões celulares. Primeiramente, foi analisada a estabilidade de expressão de doze candidatos a genes de referência (24S, ACT, GAPDH, CYCL, EF1a, TUB, PP47, PP2A, RPL39, APRT, UBQ, 14-3-3) em diferentes tecidos e fases de desenvolvimento relacionados a embriogênese somática do cafeeiro. As análises foram realizadas através da ferramenta RefFinder que compila os algoritmos estatísticos geNorm, NormFinder, BestKeeper e Delta-Ct. Os resultados obtidos sugerem que não há um gene de referência universal adequado para todas as variáveis experimentais. A expressão mais estável em calo não embriogênico, calo embriogênico e suspensão celular em diferentes tempos de cultivo correspondeu aos genes UBQ, ACT e APRT, respectivamente. O gene RPL39 apresentou maior estabilidade na análise em conjunto de calos não embriogênicos e embriogênicos. Enquanto em plântula e embrião nos diferentes estádios, PP2A apresentou maior estabilidade de expressão. A análise em conjunto de todas as amostras indicou que 24S e PP2A são os genes de referência mais adequados para normalização de dados de RT-qPCR. Com o auxílio de ferramentas de bioinformática, foram identificados apenas três possíveis ortólogos de VAL2 (C15, SEA1 e SIC1) dentre os genes da família LAV. Os perfis de expressão verificados in vivo diferiram dos obtidos in silico, os dados mostraram expressão quantitativa relativa variável do C15 e SIC1 em todas as amostras analisadas e ausência de expressão de SEA1 em todos os tecidos. Não foi verificado relação dos níveis de expressão de C15 e SIC1 com o potencial embriogênico. As linhagens de suspensões celulares apresentaram o mesmo padrão histológico e aumento da taxa de regeneração em função do tempo de cultivo. O bom desenvolvimento das plântulas obtidas a partir do protocolo utilizado pode ser reflexo da alta expressão de VAL2 nos embriões cotiledonares. O conhecimento da expressão de VAL2 abre perspectiva para a melhoria do sistema de propagação via embriogênese somática, visando assegurar a conversão de embriões em plântulas normais.Item Fosfitos e subprodutos da indústria cafeeira nas respostas bioquímicas e moleculares de defesa do tomateiro à mancha bacteriana(Universidade Federal de Lavras, 2014-06-17) Costa, Josineide Rodrigues da; Resende, Mário Lúcio Vilela deA mancha-bacteriana causada por Xanthomonas perforans tem causado prejuízo econômico para a cultura do tomateiro no Brasil. O uso de indutores de defesas das plantas é uma alternativa que atende aos requisitos do manejo integrado de doenças. Objetivou-se, neste trabalho, avaliar o efeito de formulações de fosfitos e extratos vegetais na proteção do tomateiro à mancha- bacteriana e seus componentes de resistência, como a expressão de genes e a atividade de enzimas envolvidas no processo de defesa das plantas. Mudas de tomateiro foram pulverizadas com Kasumin ® , Kocide ® , Fulland ® , Reforce Cu ® , Reforce K ® , Green Fós ® , Reforce Zn ® , Green Force Cuca ® ,Green Force S ® , ET 64 ® , Big Red ® , Green Force KP ® nas suas respectivas doses indicadas para campo e inoculadas quatro dias depois com Xanthomonas perforans. O efeito tóxico direto dos produtos in vitro, foi testado nas mesmas concentrações utilizadas no experimento in vivo, além de 50 e 25% das doses de cada produto utilizado. Os produtos foram adicionados ao meio de cultura Kado 523 e após a solidificação dos meios, foram inseridos 10 μL de suspensão bacteriana, sendo verificado o efeito tóxico pela inibição do crescimento da bactéria. Para a avaliação dos componentes de defesa da planta, foram determinadas as atividades das enzimas peroxidases (POX), catalases (CAT), ascorbato peroxidases (APX), superóxido dismutases (SOD) e fenilalanina amônia-liases (PAL). Realizou-se também a análise do efeito do Fulland ® e do Green Force CuCa ® sobre o perfil da expressão gênica dos genes CAT, SOD, PAL e POX. Os tratamentos Green Force Cuca ® , Fulland ® e Reforce Zn ® proporcionaram a maior proteção do tomateiro contra a mancha-bacteriana. Com relação ao experimento in vitro, Xanthomonas perforans demonstrou resistência ao antibiótico casugamicina em todas as concentrações testadas e sensibilidade aos produtos com formulações à base de nutrientes, de subprodutos da indústria cafeeira, hidróxido de cobre e estreptomicina. Observou-se também que os produtos Green Force CuCa ® e Fulland ® induziram as respostas de defesa das plantas de tomateiro contra mancha-bacteriana, pois a atividade das enzimas POX, CAT, APX foi maior antes e após a inoculação. Já a enzima superóxido dismutase teve sua atividade aumentada somente após a inoculação. A atividade da PAL não foi aumentada nas plantas de tomateiro em momento algum. Esses resultados demostraram o efeito aditivo da expressão gênica dos genes que codificam para as enzimas da CAT, SOD, PAL e POX, na presença de indutores Green Force CuCa ® e Fulland ® e inoculados com a fitobactéria em mudas de tomateiro.Item Desenvolvimento de embriões e plântulas de Coffea arabica L. oriundas de embriogênese somática direta(Universidade Federal de Lavras, 2015-10-19) Rezende, Juliana Costa de; Pasqual, MoacirO melhoramento genético do cafeeiro tem incorporado por meio de cruzamentos, ganhos genéticos para produtividade e outras características de interesse agronômico. A introdução de métodos biotecnológicos para auxiliar os programas de melhoramento genético tem se mostrado bastante útil, principalmente em culturas perenes, como é o caso do cafeeiro. Um importante método de propagação in vitro de plantas de Coffea é a embriogênese somática. Diante dos fatos, objetivou-se, com este trabalho, desenvolver embriões e plântulas de Coffea arabica L. cv. Rubi provenientes de embriogênese somática direta. No desenvolvimento de embriões somáticos, avaliou-se a influência de NH 4 NO 3 (0%; 25%; 50%; 75 e 100%) x KNO 3 (0%; 25%; 50%; 75% e 100%) e a influência de sacarose (0; 15; 30; 45 e 60mg.L -1 ) x GA 3 (0; 2,5; 5 e 10mg.L -1 ). No desenvolvimento de plântulas, avaliou-se a influência de diferentes tipos de meio (MS; Knudson; WPM; White) x ágar (0; 2; 4; 6 e 8g L -1 ) e a influência de GA 3 (0; 2,5; 5; 10mg L - 1) x ANA (0; 0,25; 0,5; 1; 2mg L - 1). Os experimentos foram conduzidos em sala de crescimento com irradiância em torno de 32 Mol.m -2 .s -1 e fotoperíodo de 16 horas, com temperatura de 25 ± 1 o C. As variáveis avaliadas foram: número de folhas, comprimento da parte aérea e massa fresca da parte aérea. Na etapa de aclimatização de plântulas, foram testados dois tipos de substrato (Plantmax ® e Plantmax ® mais casca de arroz carbonizada (50%)) x fertilizante de liberação lenta (0, 0,5, 1 e 2g do fertilizante por célula). Os resultados indicaram que é possível a obtenção de plântulas micropropagadas de Coffea arabica L. cultivar Rubi via embriogênese somática direta. Para o desenvolvimento de embriões somáticos, a utilização de 50% de NH 4 NO 3 e KNO 3 é eficiente na indução de folhas. A ausência destes sais proporcionou o melhor peso e a utilização de 6mg.L -1 de GA 3 proporcionou melhor desenvolvimento no comprimento da parte aérea. Para o desenvolvimento de plântulas de cafeeiro, o meio WPM, a utilização de 10mg.L - 1 de GA 3 e 1mg.L -1 de ANA apresentaram maior eficiência. A concentração de 1,5mg.L -1 de ágar proporcionou maior número de folhas e comprimento da parte aérea. O maior peso foi obtido na ausência de ágar.