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    Embriogênese somática indireta em explantes foliares de Coffea arabica L. cv. Obatã
    (Editora UFLA, 2003-01) Maciel, Anna Lygia de Rezende; Pasqual, Moacir; Pereira, Alba Regina; Rezende, Juliana Costa de; Silva, Adriano Bortolotti da; Dutra, Leonardo Ferreira
    Objetivou-se, com este trabalho, estudar a embriogênese somática indireta em Coffea arabica L. cv. Obatã, incluindo as etapas de indução de calos, diferenciação, regeneração e formação de embriões. Segmentos foliares retirados de plantas em condições de campo foram desinfestados com álcool 70% por 1 e hipoclorito de sódio 1% durante 15 e inoculados em meio IC (indução de calos) suplementado de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L -1) e Cinetina (0, 2, 4 e 8 mg.L -1). Posteriormente, os calos foram transferidos para o meio DC (diferenciação de calos), adicionado de diferentes concentrações de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L -1) e BAP (0, 2, 4 e 8 mg.L -1); em seguida, durante a etapa de regeneração, os calos embriogênicos friáveis foram inoculados em meio R suplementado de BAP (0, 2, 4 e 6 mg.L -1 ) e sacarose (0, 15, 30, 45 e 60 g.L -1). Os meios de cultura utilizados tiveram pH ajustado para 5,6 1 antes de serem autoclavados. Os experimentos foram mantidos em sala de crescimento a 26 1 0 C. Durante as etapas de indução e diferenciação de calos, os experimentos ficaram em condições de obscuridade, e na etapa de regeneração, os experimentos foram mantidos sob fotoperíodo de 16 horas e intensidade luminosa de 35 mol.m -2 .s -1 . Concluiu-se que a combinação entre 4 mg.L -1 de 2,4-D e 2 mg.L -1 de cinetina favoreceu a indução de calos primá- rios mistos. Maior freqüência de calos embriogênicos friáveis ocorreu na presença de BAP (8 mg.L -1), associado ou não ao 2,4-D, e maior número de embriões por explante foram obtidos quando utilizou-se sacarose (30 g.L -1 ) e BAP (3 mg.L -1).
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    Micropropagação do cafeeiro por embriogênese somática via biorreator de imersão temporária
    (Universidade Federal de Lavras, 2011-11-18) Maciel, Anna Lygia de Rezende; Pasqual, Moacir
    O trabalho foi realizado em 2 etapas, na primeira, o objetivo foi otimizar a micropropagação do cafeeiro por embriogênese somática via biorreator. Os delineamentos experimentais utilizados foram inteiramente casualizados e os materiais vegetais foram matrizes 03, 05 e 18 da população de Siriema. Experimento 1: foi instalado em esquema fatorial 2x2, constituídos por 2 meios de cultura: “T3” e “MM” e 2 tipos de calos: claros e escuros, com 6 repetições. Avaliou-se, aos 60 dias, por meio da: massa fresca final e aumento de massa dos calos, densidade final das células e porcentagem do incremento de calos. Experimento 2: foram utilizadas concentrações de ANA - ácido naftaleno acético - (0,0; 0,25; 0,50; 1,00 e 2,00 mg.L -1 ) adicionadas em meio “RM”, com 6 repetições. Avaliou-se aos 60 dias o número total de embriões. Experimento 3: foram usadas 5 concentrações de Prolina (0,0; 0,5; 1,0; 2,0 e 4,0 g.L -1 ) adicionadas em meio RR, com 5 repetições e 4 setores de 100g de calos. Avaliou-se aos 120 dias o número total de embriões. Experimento 4: os tratamentos constituíram-se dos meios de cultura: T5A, T5A 1, T5A 2, T5A3 e T5A4 com 6 repetições, sendo inoculados 500 embriões por biorreator. Após 84 dias, avaliaram-se: número de embriões germinados, % de plântulas pequenas, médias e grandes e % de plântulas pequenas, médias e grandes enraizadas. O meio de cultura “MM” apresenta a maior multiplicação de calos, ANA e prolina promovem maior número de embriões e o emprego do biorreator é eficiente no processo. O objetivo da segunda etapa foi avaliar a aclimatização de somaclones de cafeeiro oriundos de biorreator. Experimento 1: foi instalado em esquema fatorial 4X3 (4 substratos: fibra de coco; 2/3 fibra de coco+1/3 areia; plantmax e 2/3plantmax+1/3 areia e 3 tamanhos de embriões cotiledonares: pequeno, médio e grande) com 4 repetições de 25 embriões. Aos 60 dias, foi avaliada a % de conversão de embriões cotiledonares em plântulas. Experimento 2: foi instalado em esquema fatorial 4X5 (4 substratos: fibra de coco; 2/3 fibra de coco+1/3 vermiculita; plantmax e 2/3plantmax+1/3 vemiculita e Stimulate: 0,0; 0,5; 1,0; 1,5; e 2,0 ml.L -1 ) com 4 repetições de 25 embriões. Aos 60 dias, avaliou-se a porcentagem de conversão. Experimento 3: foi em esquema fatorial 2X5 (substratos: plantmax e 2/3plantmax + 1/3 de vermiculita e osmocote: 0,0; 2,72; 5,45; 8,18 e 10,90g.L -1 ), com 4 repetições e 5 plantas por parcela. As avaliações foram realizadas aos 180 dias por meio: altura de plantas, diâmetro de caule, número de pares de folhas, área foliar, matéria fresca e seca de raízes e parte aérea e teores de nutrientes nas folhas. O maior porcentual de conversão é obtido com plântulas médias em plantmax, o substrato composto por plantmax e vermiculita apresenta maior porcentagem de conversão em concentrações crescentes destimulate e o osmocote na concentração de 10,9g.L -1 proporciona maior desenvolvimento das mudas.