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Item Embriogênese somática direta em foliares de Coffea arabica L. cv. acaiá cerrado: efeito de cinetina e ácido giberélico(Editora UFLA, 2007-03) Pereira, Alba Regina; Carvalho, Samuel Pereira de; Pasqual, Moacir; Santos, Flávia CarvalhoObjetivou-se estudar o efeito da cinetina, GA 3 e ANA na indução in vitro de embriões somáticos de cafeeiro pela via direta. Segmentos foliares retirados de plântulas cultivadas in vitro foram inoculados em meio de cultura MS com 50% dos sais contendo as seguintes combinações de cinetina (0; 1; 2; 4 e 8 mg L -1 ) e GA 3 (0; 2,5; 5; 10 e 20 mg L -1 ). Os meios de cultura utilizados tiveram pH ajustado para 5,8 ± 1 antes de serem autoclavados. O experimento foi mantido em sala de crescimento a 25 ± 1°C. Avaliou-se número total de embriões somáticos, o número de embriões cotiledonares, o número de embriões torpedo e a média dos comprimentos dos embriões. A ação combinada entre cinetina, GA 3 e ANA estimulou a indução de embriões somáticos pela via direta. O maior comprimento de embriões foi observado quando se utilizou 8 mg L -1 de cinetina e 8,0 mg L -1 de ANA ou 17 mg L -1 de GA 3 e 8,0 mg L -1 de ANA isoladamente.Item Calogênese in vitro em anteras de Coffea arabica L.(Editora UFLA, 2004-07) Palú, Ednamar Gabriela; Silva, Adriano Bortolotti da; Pasqual, MoacirO café é um dos mais importantes produtos do mercado internacional; porém, o tempo gasto e os recursos despendi- dos são fatores limitantes para o melhoramento do cafeeiro por meio de métodos convencionais. Contudo, a cultura de anteras surge como uma alternativa viável e de curto prazo para solução desses problemas. Com o presente trabalho, objetivou-se a produção de dihaplóides com a cultura de anteras do cafeeiro (androgênese indireta), buscando um protocolo para a fase de indução de calos. Para tanto, foi efetuada a assepsia dos botões florais e das anteras, que, em seguida, foram inoculadas em meio IC e mantidas no escuro por 8 semanas, sob temperatura de 25 o C ± 1. Para induzir a calogênese em anteras da cv. Acaiá Cerrado, foram testadas as concentrações de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L -1 ) x cinetina (0, 2, 4 e 8 mg.L -1 ) e 2,4-D (0; 0,5; 1 e 2 mg.L -1 ) x AIB (0; 0,5; 1 e 2 mg.L -1 ) mais 2iP (2 mg.L -1 ) e, para a cv. Rubi, as concentrações de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L -1 ) x cinetina (0, 2, 4 e 8 mg.L -1 ). Foi observado que a maior porcentagem de indução de calogênese em anteras na cv. Acaiá Cerrado ocorre com as combinações de 2,4-D (2 mg.L -1 ) + cinetina (1,9 mg.L -1 ) e 2,4-D (0,86 mg.L -1 ) + AIB (1 mg.L -1 )+ 2iP (2 mg.L -1 ); para cv. Rubi, a combinação de 2,4-D (1,9 mg.L -1 ) e cinetina (4 mg.L -1 ).Item Embriogênese somática indireta em explantes foliares de Coffea arabica L. cv. Obatã(Editora UFLA, 2003-01) Maciel, Anna Lygia de Rezende; Pasqual, Moacir; Pereira, Alba Regina; Rezende, Juliana Costa de; Silva, Adriano Bortolotti da; Dutra, Leonardo FerreiraObjetivou-se, com este trabalho, estudar a embriogênese somática indireta em Coffea arabica L. cv. Obatã, incluindo as etapas de indução de calos, diferenciação, regeneração e formação de embriões. Segmentos foliares retirados de plantas em condições de campo foram desinfestados com álcool 70% por 1 e hipoclorito de sódio 1% durante 15 e inoculados em meio IC (indução de calos) suplementado de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L -1) e Cinetina (0, 2, 4 e 8 mg.L -1). Posteriormente, os calos foram transferidos para o meio DC (diferenciação de calos), adicionado de diferentes concentrações de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L -1) e BAP (0, 2, 4 e 8 mg.L -1); em seguida, durante a etapa de regeneração, os calos embriogênicos friáveis foram inoculados em meio R suplementado de BAP (0, 2, 4 e 6 mg.L -1 ) e sacarose (0, 15, 30, 45 e 60 g.L -1). Os meios de cultura utilizados tiveram pH ajustado para 5,6 1 antes de serem autoclavados. Os experimentos foram mantidos em sala de crescimento a 26 1 0 C. Durante as etapas de indução e diferenciação de calos, os experimentos ficaram em condições de obscuridade, e na etapa de regeneração, os experimentos foram mantidos sob fotoperíodo de 16 horas e intensidade luminosa de 35 mol.m -2 .s -1 . Concluiu-se que a combinação entre 4 mg.L -1 de 2,4-D e 2 mg.L -1 de cinetina favoreceu a indução de calos primá- rios mistos. Maior freqüência de calos embriogênicos friáveis ocorreu na presença de BAP (8 mg.L -1), associado ou não ao 2,4-D, e maior número de embriões por explante foram obtidos quando utilizou-se sacarose (30 g.L -1 ) e BAP (3 mg.L -1).Item Multiplication of embryogenic calli in Coffea arabica L.(Editora da Universidade Estadual de Maringá - EDUEM, 2012-01) Rezende, Juliana Costa de; Carvalho, Carlos Henrique Siqueira de; Santos, Ana Carolina Ramia; Pasqual, Moacir; Teixeira, João BatistaThe goal of this project was to evaluate the embryogenic callus induction of two Coffea arabica clones selected for their characteristics of rust resistance and high yield, as well as to compare their multiplication in two different media under both solid and liquid cultivation conditions. The protocol described by Teixeira et al. (2004) was used for callus induction in a randomized block design in which each clone was considered a treatment. Evaluation of callus induction was carried out 180 days after initiation by counting embryogenic calli. For callus multiplication, the treatments consisted of two different media [stage two of Albarran et al. (2004) and the multiplication medium described by Teixeira et al. (2004)] and two cultivation systems (solid and liquid). Evaluations were conducted by weighing calli 21, 42 and 63 days after initiation of the experiment. The two studied clones exhibited the same potential for embryogenic callus induction. The potential for embryogenic callus multiplication was influenced by the plant’s genotype. When compared with the liquid system, the solid system displayed the highest level of embryogenic callus multiplication for the clones studied.Item Calli induction in leaf explants of coffee elite genotypes(Universidade Federal de Santa Maria, 2011-03) Rezende, Juliana Costa de; Carvalho, Carlos Henrique Siqueira de; Pasqual, Moacir; Santos, Ana Carolina Ramia; Carvalho, Stephan Malfitano deThree experiments were carried out with the objective of achieving high effectiveness in calli induction from high heterozygosis leaf explants of Coffea arabica through indirect somatic embryogenesis. A randomized-block design in a 2x5 factorial arrangement made up of two media [BOXTEL & BERTHOULY (1996) and TEIXEIRA et al. (2004)] and five C. arabica genotypes were used in the first experiment. In the second experiment the embryogenic calli production potential was evaluated in ten genotypes. Each of them was considered as a treatment. In the third experiment the variations in both 2.4-D (2.5 e 20μM) and 2-iP (2.5 e 20μM) concentrations in TEIXEIRA et al. (2004) medium and secondary media were evaluated. Crops were kept in a growth room under darkness, at 25±2 o C. The medium described by TEIXEIRA et al (2004) was found to be superior when compared to that described by BOXTEL & BERTHOULY (1996) in the 2.2 and 7.2 genotypes. An opposite behavior was noticed in 4.2 genotype, that is, BOXTEL & BERTHOULY (1996) had medium superiority. Both 3.0 and 5.0 genotypes had the same behavior in both media studied, which shows that the somatic embryo production depends on the genotype. Calli induction depends on the 2-iP and 2.4 D ratio. The 20.0μM of 2.4-D and 20.0μM of 2-iP combination caused the highest embryogenic calli induction rate.Item Avaliação do efeito das concentrações de sacarose e dos estádios de desenvolvimento do fruto no cultivo in vitro de embriões de frutos de cafeeiro(Universidade Federal de Viçosa, 2011-11) Jesus, Adriana Madeira Santos; Villa, Fabíola; Lara, Ana Carolina da Costa; Pasqual, MoacirA cultura in vitro é uma técnica controlada que proporciona estudar os processos nutricionais, fisiológicos e bioquímicos de embriões em vários estádios de desenvolvimento. O objetivo foi avaliar a relação entre estádio de desenvolvimento do fruto e concentração de sacarose, no meio, durante o desenvolvimento, in vitro, de embriões de cafeeiro. Frutos de Coffea arabica cv. Acaiá foram colhidos, lavados, desinfestados, seus embriões excisados e inoculados em meio de cultivo MS, com pH ajustado para 5,8. Os tratamentos consistiram em combinação de concen- trações de sacarose (0, 15, 30, 60, 90 e 120 g L -1 ) e estádios de desenvolvimento do fruto (chumbinho, chumbo, verde, verde-cana, cereja e passa). Após a inoculação, os embriões foram incubados em sala de crescimento, a 27 ± 1 oC, fotoperíodo de 16 horas e 35 μ mol m -2 s -1 de intensidade luminosa. O delineamento experimental utilizado foi inteira- mente casualizado, em esquema fatorial 6 x 6, com seis repetições constituídas por quatro tubos cada. Após 60 dias de desenvolvimento, as plântulas foram avaliadas com base no comprimento da parte aérea, massa de matéria fresca total da parte aérea e das raízes. Observaram-se influências das concentrações de sacarose e dos estádios de desenvolvi- mento do fruto no crescimento e desenvolvimento das plântulas. Resultados satisfatórios para todas as variáveis estudadas foram obtidos com embriões excisados no estádio verde, inoculados em meio de cultivo suplementado com 51 a 70 g L -1 de sacarose.Item Concentrações de 2,4-D e cinetina na indução de calos em anteras de Coffea arabica(Embrapa Café, 2009) Araujo, José Sérgio; Pasqual, MoacirOs meios para a cultura de tecidos de plantas fornecem substâncias essenciais e controlam o padrão de desenvolvimento “in vitro”. Baseiam‐se nas exigências da planta, com algumas modificações para atender às necessidades específicas “in vitro”. Compostos são adicionados ao meio para suprirem as necessidades das células.Item Germinação de embriôes zigóticos de Coffea arabica in vitro em meio formulado com base em teores foliares(Embrapa Café, 2007) Lara, A. C. C.; Jesus, A. M. S.; Cerqueira, F. C. de; Carvalho, S. P. de; Mendes, A. N. G.; Pasqual, Moacir; Custódio, Telde NatelEste trabalho tem como objetivo avaliar a influência de diferentes concentrações (0; 50; 100; 150 e 200%) de um meio de cultura formulado com base em teores foliares de mudas do cafeeiro (Roger, 2003).Item Development of Coffea arabica L. seedling obtained from direct somatic embryogenesis(Editora UFLA, 2008-01) Rezende, Juliana Costa de; Ferreira, Ester Alice; Pasqual, Moacir; Villa, Fabíola; Botelho, César Elias; Carvalho, Samuel Pereira deThis work aimed to develop embryos and acclimatize seedlings of Coffea arabica L. cv. Rubi produced by direct somatic embryogenesis. For the development of somatic embryos, were evaluated the effect of sucrose (0; 15; 30; 45 and 60 g.L-1) and GA3 (0; 2.5; 5 and 10 mg.L-1). For the development of seedlings, were evaluated the influence of GA3 (0; 2.5; 5; 10 mg.L-1) and NAA (0; 0.25; 0.5; 1; 2 mg L-1). The in vitro experiments were carried out in a growth chamber under light intensity of 32 μMol.m-2.s-1, at the temperature of ± 25 1oC and photoperiod of 16 hours. The parameters evaluated were: number of leaves, length of the aerial part and fresh weight of the seedlings. For the seedling acclimatization process two types of substrates were tested (Plantmax® and Plantmax® plus carbonized rice peels (v/v 1:1) and fertilizer with slow-release (Osmocote®) (0, 0.5, 1 and 2 g of the fertilizer per cell). The results indicated that 5.81 mg L-1 GA3 was efficient for the development of coffee somatic embryos and GA3 (10 mg. L-1) in combination with 1mg. L-1 NAA showed efficiency in the development of the seedlings obtained by direct somatic embryogenesis. The best substrate for acclimatization was Plantmax® mixed with carbonized rice peels and 1.68 g per cell of the Osmocote® fertilizer.